Desarrollo de superficies modificadas oro - anticuerpo anti-PSPB para su uso como biosensor en la detección de preñez bovina

  • Justo Laíz Unidad de Bioquímica Analítica, Centro de Investigaciones Nucleares (CIN), Facultad de Ciencias , Universidad de la República, Uruguay
  • Karen Keel Unidad de Bioquímica Analítica, Centro de Investigaciones Nucleares (CIN), Facultad de Ciencias , Universidad de la República, Uruguay, Departamento de Aguas y Productos Químicos, Laboratorio Tecnológico del Uruguay (LATU), Uruguay
  • Juan Pablo Tosar Unidad de Bioquímica Analítica, Centro de Investigaciones Nucleares (CIN), Facultad de Ciencias , Universidad de la República, Uruguay

Resumen

En este trabajo se presentan los resultados preliminares para el desarrollo de un biosensor amperométrico destinado a la cuantificación de Proteína B Específica de la Preñez (PSPB) en fluidos biológicos como medio de diagnóstico clínico precoz de la preñez bovina. A la superficie de oro modificada con ácido mercaptoundecanoico (MUA) se fijaron anticuerpos anti-PSPB y peroxidasa de rábano (HRP). Se verificó la inmovilización de las biomoléculas mediante voltamperometría cíclica y medida del ángulo de contacto.Se estudió el comportamiento electroquímico del electrodo desarrollado por medio de voltamperometría cíclica y medidas a potencial constante, estableciendo la relación entre el cambio de corriente catódica (al potencial de reducción de la quinona) y la concentración de PSPB. Esta relación se ve afectada por la formación de complejos antígeno – anticuerpo que limitan el acceso del sustrato al sitio activo de la enzima, provocando una disminución en la señal eléctrica.El electrodo modificado de oro - anti-PSPB – HRP respondió de forma inversamente proporcional a la concentración de PSPB a un potencial de -200 mV (contra electrodo de referencia Ag/AgCl), tanto por voltamperometría cíclica como a potencial constante, y por tanto podría ser la base para el desarrollo de un biosensor amperométrico para detectar precozmente la preñez bovina.

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Citas

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